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WGA技術如何選擇?單細胞全基因組測序技術是在單細胞水平對全基因組進行擴增與測序的一項技術,其原理是對分離的單個細胞的微量全基因組DNA進行擴增,獲得高覆蓋率的完整的基因組后進行高通量測序,廣泛應用于癌癥研究、胚胎發育、輔助生殖、細胞分化、免疫機制、微生物等方向的研究。獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴增產物是準確全面的測序結果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無偏好性的擴增,在單細胞測序技術誕生的近二十年時間里,全基因組擴增技術經歷了幾次重大的變革,WGA主要有三種方式:DOP-PCR,MDA,MA...
2020 10-16
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膠原酶的使用膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶,它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此,它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。膠原酶是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬,內含較多結締組織或膠原成分時,用胰蛋白酶解離細胞的效果較差,這時可采用膠原酶解離細胞法。膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮...
2020 10-16
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當ThruPLEX技術遇上FFPE樣本,會帶來怎樣的“*操作”!FormalinFixedandParaffinEmbeddedFFPE樣本作為生物和醫學領域的重要樣本來源,廣受研究者的青睞。由于樣本固定和儲存過程中,容易發生核酸的降解和損傷,因此獲得符合測序質量要求的文庫通常很具有挑戰性。那么面對做DNA-Seq的FFPE樣本,應該如何應對呢?“想要隨心所欲的進行FFPE-DNA樣本文庫構建”,這個神器值得擁有?【SMARTerThruPLEXDNA-SeqKit】“飛一般感覺”的操作FFPE樣本珍貴,擔心在文庫制備時損失?選擇它吧。該...
2020 10-12
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病原微生物NGS解決方案來了,您準備好項目了嗎?病原微生物NGS解決方案來了,您準備好項目了嗎?人類與感染性疾病的戰斗持續了幾千年。但自17世紀列文虎克用顯微鏡觀察到微生物后,人類才逐漸認知到了感染性疾病是由病原微生物導致,逐步開啟了病原微生物的研究。主要的研究方法包括經典的培養鑒定法、實時熒光定量PCR法、NGS分析、質譜分析等多種方法。其中NGS由于可直接從宿主中快速而正確地檢測鑒別病原體的全基因組序列,以及通量高、數據庫全等特點,逐漸成為微生物研究領域的重要方法,并為后續實現對感染性疾病診斷、治療及預防提供技術保障。...
2020 10-12
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Takara真香推薦—簡便好用的液態活檢解決方案之游離DNA篇在腫瘤早期篩查研究領域,循環腫瘤DNA(ctDNA)一直是各大廠商、科研工作者關注的重點。雖然ctDNA的應用日趨成熟,但總有一些微量的ctDNA樣本無法用傳統技術完成高品質文庫的構建,特別是在進行腫瘤早期診斷有重要價值的稀有突變分析時。如何以微量ctDNA起始構建可準確分析稀有突變的文庫?Takara的解決方案是引入分子標簽技術!■微量ctDNA樣本無法準確分析稀有變異?自帶1600萬分子標簽的建庫技術了解一下ThruPLEXTag-SeqKit是Takara推出的采用莖環...
2020 10-12
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PicoPLEX技術助力輔助生殖研究輔助生殖技術(包括人類輔助生殖技術和人類精子庫)是指運用醫學技術和方法對配子、合子、胚胎進行人工操作,以達到受孕目的的技術,分為人工授精技術、體外受精-胚胎移植技術及相關衍生技術【1】。其中體外受精-胚胎移植技術及其各種衍生技術(Invitrofertilization,IVF)近些年來備受關注。簡單的說,就是大家耳熟能詳的試管嬰兒技術。“試管嬰兒”的前世今生?1978年世界上*試管嬰兒誕生,從此開創了生殖醫學領域的新紀元。試管嬰兒是指從女性體內取出卵子,在器皿內培養后,加入...
2020 10-10
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UDI? UMI?文庫構建試劑盒如何選擇相信有些小伙伴已經隱隱約約有聽說過UDI和UMI這兩個英文縮寫,但是一直沒搞清楚它們全名是啥?它們能干啥?在正文開始前,我們先來“揭秘”UDI和UMI的全稱:UDI的全稱為UniqueDualIndex,譯為雙端不重復標簽技術。UMI的全稱為UniqueMolecularIdentifier,譯為分子條形碼或者分子標簽技術。別急,要弄清這兩個概念,還得從二代測序的那些事情說起:我們都知道二代測序技術是近十年來曝光率非常高、非常受關注的基因組分析技術。以Illumina為代表的...
2020 10-10
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細胞凍存液的配制方法和注意事項細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中,及時凍存...
2020 10-9
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